IMC i07B1 脱リン酸化とセルフライゲーション防止

制限酵素断片の両末端を脱リン酸化します

環状ベクター配列を読み込みます

  1. サンプル例:「pColdV.gbk」を読み込みます。
    • フィーチャーマップが表示されます。

ベクターを制限酵素で開環します

  1. サンプル例:制限酵素BamHI で切断します。
    • 1箇所だけ切断され、ベクターは開環されます。

両末端を脱リン酸化します

  1. 「Dephosphorylation」ボタンをクリックします。
    • 「Dephosphorylation」確認メッセージが表示されます。ボタンは赤く変化します。
  2. 「はい(Y)」をクリックします。
    • ベクターの両端が脱リン酸化されます。

開環されたベクターをセルフライゲーションさせ、再環状化をトライします。

  1. 「Ligation」ボタンをクリックします。
    • 「Ligation」Window が表示されます。
  2. 「Self Ligation」にチェックを入れます。
  3. 「First Fragment」にプルダウンメニューで開環されたベクターを選択します。
  4. 「Ligation」ボタンをクリックします。
    • セルフライゲーションできない旨エラーメッセージが表示されます。