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Questions from Users (IMC)
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IMC: ホモロジー検索の方法 14 years 7 months ago #24

  • akr-sp-1212728882
  • akr-sp-1212728882's Avatar Topic Author
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in silico molecularcloningをつかって、ウイルスのゲノムデータのホモロジー検索を行いたいと考えております。
そこで、
1)NR data baseのダウンロード方法
 (ウイルスのデータベースもあれば)と、
2)ダウンロードしたデータベースをin silico molecularcloningにいれて、実際に検索する方法
をお教えいただければと存じます。

「2010/06/30 K大学Tさんからの質問」代理投稿しました。-Forum Administrator-

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Last edit: by akr-sp-1212728882.

回答いたします 14 years 7 months ago #25

  • akr-sp-1212728882
  • akr-sp-1212728882's Avatar Topic Author
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まず、アミノ酸データベースです。
NRは2.6GBもありますので、
まずはSwissProtか、ウイルスだけのアミノ酸データベースで
試されるのがよいと思います。

NRデータベースのサイト
ftp://ftp.ncbi.nih.gov/blast/db/FASTA/nr.gz

SwissProtデータベース
ftp://ftp.ncbi.nih.gov/blast/db/FASTA/swissprot.gz

ウイルスのデータベース(2つに分割されています)
ftp://ftp.ncbi.nih.gov/refseq/release/vi...ral1.protein.gpff.gz
ftp://ftp.ncbi.nih.gov/refseq/release/vi...ral2.protein.gpff.gz


1.上記をダウンロードして、どこかに保存します。
2.IMCを起動します。
3.メニューFile → Create Blast DBを選択(あるいは上段中央のDBボタンクリック)します。
4.Blast DB Listというウィンドウが開きます。
5.Add Amino Acid DBをクリックします。
6.Blast DB Settingというウィンドウが開きます。
7.Amino Acid File欄にRefボタンをクリックして、保存した上のデータファイルを指定します。
  ウィルスデータの場合は、同時に2ファイル指定してもOKです。
8.DB Nameに任意の名前(半角アルファベットがよい)を入力します。
9.Save Local Directoryの方を選びます。
10.Setボタンをクリックします。
11.データベースが登録されます。
12.一旦、Blast DB Listウィンドウを閉じます。
1個ずつ相同性検索を実行する場合
11.フィーチャーマップの任意のORF/CDSを右クリックします。
12. メニューでShow Homology AA(Amino Acid DB)を選びます。
13.登録されたDBを選びます。
14.相同性検索が実行されます。
全部のCDS/ORFあるいは指定領域にあるすべてのCDS/ORFを相同性検索する場合
11.フィーチャーマップ上をマウスドラッグします。
12.領域がカラーで表示されます。
13.その領域上でマウス右クリックします。
    以下同じ。
全部のCDS/ORFを相同性検索する場合
11.メニューのGenome Analysis → Homology Search by All Featureをクリックします。
    以下同じ。

とりあえず、ここまでトライしていただけませんか?

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