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IMC P05A アミノ酸配列マッピングの使い方

  • アミノ酸配列を参照ゲノム塩基配列上にマッピングし、新規フィーチャーとして登録します
  • 指定したアミノ酸配列(複数可能)を、現在フィーチャーマップとして表示されている参照ゲノム上にマッピングし、ヒットしたエントリーを新規フィーチャー(mRNAなど)として登録します。
  • マッピングには、tBlastNのアルゴリズムが使用されます。

アミノ酸配列マッピングの操作方法

  1. 参照ゲノムの塩基配列を読込み、フィーチャーマップ上に表示します。
  2. IMC732 H301 0001
  3. メニューからGenome Analysis -> Mapping -> A.A. Sequence Mapping をクリックします。
  4. IMC732 H301 0002
  5. A.A.Sequence Mapping実行ダイアログが表示されます。
  6. IMC732 H301 0003
  7. A.A.Sequence File(s) のRef… をクリックして、マッピングするアミノ酸配列を指定します。
  8. ここで、指定できるアミノ酸配列は、FastAフォーマット、GenPeptフォーマットなどです。gzで圧縮されたファイルも指定可能です。
  9. アミノ酸配列選択するダイアログが表示されます。
  10. アミノ酸配列ファイルを指定します。
  11. IMC732 H301 0004
  12. Runボタンをクリックします。
  13. 確認メッセージが表示されます。
  14. IMC732 H301 0005
  15. パラメータを変更する場合は、Parameterボタンをクリックします。
  16. IMC732 H301 0006
  17. このパラメータはNCBI Blastのパラメータ設定に基づいています。
  18. 通常はデフォールトのパラメータ設定を使用します。
  19. 「はい(Y)」ボタンをクリックすると、マッピングの実行が開始されます。
  20. 実行時間は、アミノ酸配列の個数や配列長、参照ゲノム塩基配列の塩基長に比例します。
  21. 実行中は、処理進捗状況を占めるメッセージが表示されます。
  22. IMC732 H301 0009
  23. マッピング処理が終了すると、結果リストダイアログが表示されます。

  24. IMC732 H301 0010
  25. 各行のAlignmentをクリックすると、ペアワイズアラインメントダイアログが表示されます。
  26. IMC732 H301 0011
  27. 結果リストダイアログを使って、新規フィーチャーを登録します。
  28. マッピング結果は、3タイプに分類されます。
    • 入力アミノ酸が、完全に参照ゲノム塩基配列にマッチした場合
    • 入力アミノ酸が、不完全に参照ゲノム塩基配列にマッチした場合
    • 入力アミノ酸配列が、まったくマッチしない場合
  29. 前者2タイプの結果は、参照ゲノム上に新規フィーチャーとして登録することができます。たとえば、完全マッチ配列を、mRNAフィーチャーとして登録し、不完全マッチ配列は、miscRNAフィーチャーとして登録することができます。CDSなど別のフィーチャーキーを指定することも可能です。
  30. Insert Featureをクリックします。
  31. 確認メッセージが表示されます。
  32. IMC732 H301 0013
  33. 「はい(Y)」をクリックします。
  34. Feature Settingダイアログが表示されます。
  35. IMC732 H301 0015
  36. 新規登録されるフィーチャーの任意のQualifierに同一のValueを設定できます。また、Qualifier /locus_idに指定した接頭文字と、任意の桁数をもち、任意の数値から開始される連番を登録することができます。
  37. IMC732 H301 0015
  38. イントロンをもつ真核生物の場合は、エクソン・イントロン領域を識別してフィーチャー登録されます。
  39. イントロンの最大塩基長を制限できます。
  40. Run をクリックします。
  41. Feature登録が完了すると完了メッセージが表示されます。
  42. IMC732 H301 0016
  43. OKをクリックします。
  44. メインフィーチャーマップに登録されたフィーチャーが表示されます。
  45. IMC732 H301 0017

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