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IMC i02A 配列レーン上からのプライマー登録

  • PCR プライマーセットをメインフィーチャーマップの配列レーンの塩基配列上から登録します。

登録操作

  1. テンプレートとなる塩基配列をメインカレントディレクトリ―にロードします。
  2. ロードされた配列がメインフィーチャーマップに表示されます。
  3. IMC732 H301 0035
  4. メインフィーチャーマップに配列レーンが表示されていない場合は、配列レーンをメインフィーチャーマップに追加します。
  5. PCR 増幅したい領域の上流側のPlus Strand 上の塩基配列をマウスでドラッグします。
  6. ドラッグされた塩基配列が赤く反転表示されます。
  7. IMC732 H301 0036
  8. 塩基配列上で、マウスを右クリックします。
  9. ポップアップメニューが表示されます。
  10. IMC732 H301 0021
  11. メニューから「Save as a Primer」をクリックします。
  12. 「Primer Registration」ダイアログ が表示されます。
  13. IMC732 H301 0023
  14. 「Primer ID」にユニークな名称を入力します(デフォールトではprimer+塩基位置番号が設定されます)。
  15. 「Primer Sequence」にはコピーされた塩基配列が大文字で自動的にペーストされています。
  16. 「Comment」欄には自由に記述できます。
  17. 「Save」をクリックします。
  18. Forward プライマーが登録されます。
  19. 同様に Reverse Primer を登録します。
  20. Reverse primer の場合は配列レーンのPCR増幅予定領域の下流の Minus Strand をマウスでドラッグします。

 IMC732 H301 0022

登録されたプライマーの確認操作

  1. メニューからCloning -> Primer Design -> PCR Primer Registration をクリックします。
  2. Priming Site Search Window が表示されます。
  3. ここには、さきほど登録したプライマーが配列や、Tm、GC 含量などとともに表示されています。
  4. 最近登録されたプライマーはリストの一番下にあります。
  5. IMC732 H301 0034

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