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環状ベクターを制限酵素で開環します

操作

1. 環状ベクターの塩基配列をカレントメインディレクトリ―にロードします。
2. 例としてサンプル配列 「pColdV.gbk」をロードします。
3. メインフィーチャーマップにロードした配列が表示されます。
4. 
5. このベクターを一箇所だけ切断する制限酵素を見つけます。
6. メニューから「Cloning -> Restriction Enzyme -> RE Registration & Editing…」ボタンをクリックします。
7. 
8. 「Enzyme Selection」ダイアログが表示されます。
9. 
10. 「Select Enzyme」セクションの「Result」フィールドで「Any Enzyme」にチェックします。
11. 「which have from」および「To」フィールドに「1」を入力します。
12. 「Select All」をクリックします。全部の制限酵素にチェックされます。
13. 
14. 「Show Recognition Site…」をクリックします。
15. 「Recognition Site」ダイアログが表示されます。
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17. たとえば、BamHI がMCS を１箇所だけ切断することがわかったので、BamHI にチェックを入れます。
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19. 右側ペインに認識部位が表示されます。
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22. 右側ペインのBamHIにチェックを入れ、「Digestion」ボタンをクリックします。
23. 確認メッセージが表示されます。
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25. 「はい（Y）」をクリックします。
26. 「Digestion list」Window が表示されます。
27. 消化断片は１個だけリストされています。
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29. その断片にチェックをつけ、「Load」ボタンをクリックします。
30. 
31. 「Completed!!」完了メッセージが表示されます。
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33. 「OK」をクリックします。
34. メインフィーチャーマップに開環されたベクター配列がロードされます。
35. 線状になったDNAは、水平方向へのスクロールに終点があります。
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37. メニューから「Cloning　-> Ligation -> Simple Ligation…」をクリックします。
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39. Ligation ダイアログが表示されます。
40. リストの一番下に開環されたベクターがあり、その両末端の形状が表示されます。
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42. 末端形状は、メインフィーチャーマップの配列レーンでも見ることができます。
43. 水平方向にスクロールが止まるまでスクロールします。
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